洁净环境新挑战！微生物监测标准升级解读

微生物监测应该遵循什么标准呢？让我们看看ISO 14698:2003和EN17141:2020。

ISO 14698:2003概述

第1部分：ISO 14698-1:2003概述了洁净室和相关受控环境中生物污染控制的一般原则和方法。该标准建立了一个评估和控制生物污染的正式系统，确保洁净室技术有效地监测和减轻污染风险。以下是ISO 14698-1的关键要素概述：

ISO 14698第1部分的关键原则

危害识别和风险评估

•识别潜在危害：确定可能影响生产过程或产品质量的生物污染源。

•风险评估：评估这些危害发生的可能性，并确定预防或控制措施。

风险区域的指定

•风险区分类：根据污染风险水平对洁净室内的不同区域进行分类。

•控制措施：实施程序和条件，以消除或减少这些区域内的生物污染机会。

控制限值和监测

•确定控制限值：为每个风险区确定可接受的生物污染水平。

•监测计划：制定定期监测计划，以一致地观察和测量生物污染水平。

纠正措施

•触发条件：设定条件，一旦满足，需要立即采取纠正措施。

•纠正程序：实施程序以解决和纠正生物污染事件。

验证和文件

•验证程序：建立测试和补充程序，以验证生物污染控制系统的有效性。

人员培训

培训计划：为洁净室人员制定和实施培训计划，以确保他们了解生物污染控制实践和程序。

目标

•推广卫生实践：确保洁净室内的所有活动都符合高标准的清洁和卫生。

•最小化污染风险：降低影响生产过程或产品质量的生物污染风险。

•确保合规性：使洁净室实践符合国际标准和监管要求。

实施

为了有效实施ISO 14698-1，企业需要建立一个量身定制的正式体系，以满足其特定的需求和条件。这包括制定适当的监控指南、人员培训计划和全面的文档实践。最终目标是及时检测和控制生物污染，确保清洁安全的生产环境。

第2部分：ISO 14698-2:2003为评估和解释在洁净室和受控环境中收集的微生物数据的方法提供了指导。这部分标准对于确保生物污染控制措施的有效性以及收集的数据准确反映微生物污染水平至关重要。

ISO 14698第2部分的关键原则

微生物数据评估

•目的：提供一种标准化的方法来评估洁净室的微生物数据。

•方法：描述了估计和解释活颗粒取样结果的各种方法。

数据解读

•指导：就如何解释微生物数据以评估不同风险区的生物污染水平提供详细指导。

•应用：确保数据的解释是一致的，并与ISO 14698-1中概述的控制措施保持一致。

纠正措施和验证

•触发条件：定义当生物污染水平超过控制限值时触发纠正措施的条件。

•核查程序：包括核查生物污染控制措施有效性的程序。

目标

•标准化评估：确保采用一致的方法评估不同洁净室和受控环境中的微生物数据。

•有效控制：通过为数据评估和解释提供明确的指导方针，提高生物污染控制措施的有效性。

实施

ISO 14698-2应与ISO 14698-1结合使用，为生物污染控制提供全面的框架。该标准帮助洁净室操作员实施有效的监测策略，准确解释微生物数据，并采取适当的纠正措施来维持洁净室标准

通过遵守ISO 14698-2，组织可以确保其洁净室环境得到有效监测，生物污染风险降至最低，并保持法规合规性。

有关更多详细信息，您可以参考官方ISO 14698-2:2003文件和有关生物污染控制标准的相关资源。

“应选择和执行适当的取样方法和相关程序，以反映情况的复杂性和多样性。应使用根据书面程序和设备提供的说明选择的设备和方法进行取样

EN 17141标准概述

微生物数据评估

EN 17141:2020是欧洲标准，规定了洁净室和受控环境中生物污染控制的要求和最佳实践。本标准取代了旧的EN ISO 14698-1:2003和EN ISO 14698-2:2003标准，为确保各种洁净室应用中的微生物控制提供了更全面和更新的框架。

EN17141:200的主要原则和要求

生物污染控制系统

•EN 17141强调实施正式的生物污染控制系统。这包括识别和评估污染源、风险管理以及建立监测计划，以确保对微生物污染的持续控制。

风险评估

•该标准要求进行彻底的风险评估，以确定潜在的生物污染源，评估污染的可能性和影响，并确定适当的控制措施。这有助于根据洁净室环境的需求和风险量身定制生物污染策略。

环境监测计划EN 17141概述了制定详细环境监测计划的必要性。该计划应包括：

•监测位置和频率

•建立警报和行动限制

•记录和趋势数据的文件系统

•对参与监测活动的人员进行培训和教育微生物测量方法

•该标准为选择适当的微生物测量方法提供了指导，包括体积空气取样、表面取样和培养基选择。它强调对这些方法的验证，以确保准确可靠的数据收集。

控制演示

•EN 17141的一个关键方面是要求证明生物污染控制系统的有效性。这涉及对微生物数据的定期分析和趋势分析，对不符合规范的结果进行调查，并保持全面的记录以支持审计和验证过程。

持续改进

•该标准提倡对生物污染控制系统进行持续审查和改进。这包括根据新数据、技术进步和洁净室环境的变化定期更新风险评估、监测计划和控制措施。

实施

为了符合EN 17141，组织应进行差距分析，以确定当前做法与新标准之间的差异。该过程涉及审查和更新质量管理体系（QMS），以纳入EN 17141的要求，确保有效识别和管理所有潜在的污染源。

主要优势

•加强生物污染控制：通过遵循EN 17141，组织可以确保洁净室中的微生物控制水平很高，降低污染风险，提高产品安全性和质量。

•监管合规性：遵守此标准有助于组织满足监管要求，避免不合规风险和潜在处罚。

•改进的风险管理：EN 17141基于风险的方法允许采取有针对性和有效的控制措施，优化资源使用，加强整体洁净室管理。

选择最佳采集介质：选择最佳的微生物培养采集介质是微生物学家的一个常见问题，也是一个经常争论的话题。根据美国食品药品监督管理局的规定，用于环境监测的微生物培养基必须经过验证，能够检测真菌（即酵母和霉菌）以及细菌。培养基必须在适当的时间和温度条件下培养，以确保准确的结果。

（TSA 90mm琼脂培养基在洁净室中的广泛应用示例）

环境监测中使用最广泛的琼脂

•胰蛋白胨大豆琼脂（TSA）：主要用于需氧细菌。

•沙氏葡萄糖琼脂（SDA）/沙氏麦芽糖琼脂（SMA）：常用于真菌（酵母和霉菌）。

环境监测的最佳介质

一项研究表明，使用含有1%葡萄糖的TSA并在25°C下孵育5天，可以作为细菌和真菌（包括霉菌和酵母）的通用培养基。该研究得出结论，虽然单独使用SDA不适合作为通用环境培养基，但含有1%葡萄糖的TSA可以将真菌恢复提高到与SDA相同的水平。这使得TSA与葡萄糖成为一种实用的选择，特别是在繁忙的制药应用中，因为它允许使用单一培养基进行全面的环境监测。然而，如果使用的琼脂发生变化，应进行验证研究以确保其有效性。

常用琼脂

至关重要的是，无论使用何种培养基，都应该对其进行验证，以支持被培养生物体的生长。该验证确保培养基能够可靠地检测和支持目标微生物的生长，提供准确和一致的环境监测结果。通过了解不同培养基的优势和局限性并确保适当的验证，微生物学家可以有效地监测和维护洁净室环境的清洁度。

验证方案示例

1.生长促进测试：

用10-100CFU的枯草芽孢杆菌、巴西曲霉和其他相关生物接种TSA和SDA平板。

将TSA在30-35°C下孵育3天，将SDA在20-25°C下孵化5天。

将试验板和对照板上的CFU数量进行比较，以确保至少70%的回收率。

2.无菌检测：

将未接种TSA和SDA的平板分别在30-35°C和20-25°C下孵育3天和5天。

确保没有观察到微生物生长。

3.环境适应性测试：

将TSA和SDA板放置在洁净室的不同区域。

使用冲击空气采样器对空气进行采样。

在指定条件下孵育平板，并评估形成的菌落数量。

通过遵循这些步骤并遵守监管指南，您可以确保洁净室微生物空气取样中使用的琼脂培养基经过验证，提供可靠准确的结果。

污染控制策略（CCS）

ISO 14698和EN 17141：

ISO 14698和EN 17141都强调了全面CCS的重要性。该策略涉及识别潜在的污染源，实施控制措施，并持续监测和评估这些措施的有效性。关键组成部分包括风险评估、定期监控和文件记录，以确保持续的合规性和改进

（基于欧盟GMP附件1指南的CCS概述）

应在整个工厂实施CCS，以确定关键控制点，并评估所有控制和监测措施的有效性，以管理产品质量和安全风险。应积极审查CCS，必要时进行更新，并推动制造和控制方法的持续改进。其有效性应成为定期管理审查的一部分。CCS中应参考现有的控制系统，并应了解它们的相互作用。

CCS是一份文件化的计划，概述了控制制造设施污染的所有措施和程序。它是良好生产规范（GMP）指南的关键组成部分，特别是对于无菌产品生产。

为什么CCS很重要

CCS的主要目标是确保无菌药品不受污染，这对患者安全至关重要。通过系统地控制和监测所有潜在的污染源，制造商可以保持高标准的产品质量并遵守监管要求。

在实践中：

想象一下，一家制药公司生产无菌注射药物。他们的CCS将包括：

•详细的穿衣和洗手程序，以确保人员不会引入污染物。

•使用隔离器或限制进入屏障系统（RABS）保护无菌环境免受人为干预。

•常规空气和地表采样，以尽早检测任何微生物污染。

•为所有在洁净室工作的员工定期举办培训课程，以加强良好的无菌操作。

总之，CCS就像是在无菌药品生产中保持清洁和无菌的详细蓝图，确保患者安全和产品质量的最高标准。

污染源及控制措施常见污染源

•空气中的颗粒物：灰尘、纤维和其他微观颗粒。

•人员产生的颗粒：皮肤鳞片、头发和衣物纤维。

•设备和材料：引入洁净室的机械和材料。

•暖通空调系统：过滤不足或系统维护不善。

•工艺和清洁程序：制造工艺和无效的清洁方法。

控制措施

•空气过滤：使用HEPA过滤器去除空气中的颗粒物。

•灭菌：对设备和材料进行灭菌，以消除微生物。

•限制进入：仅限经过培训的合格人员进入洁净室。

•监测和测试：定期进行环境监测，以确保控制措施有效。

（EUGMP附件1:2022关于污染控制策略的声明）

案例研究：RAC系统实施

RAC系统被集成到制药洁净室环境中，以持续监测用于ATMP无菌处理的生物安全柜内的空气污染物。该系统配置为以1 CFM的速度对空气进行采样，确保最佳的冲击速度和准确的数据收集。

（ATMP无菌加工中BSC柜的环境监测概述）

结果和好处

•提高合规性：该系统符合所有监管要求，包括欧盟GMP附件1。

•增强数据完整性：实时数据收集和记录确保了准确可靠的监控。

•降低污染风险：持续监测可立即检测和应对污染事件。

设置和集成

RAC系统被集成到制药洁净室环境中，以持续监测用于ATMP无菌处理的生物安全柜内的空气污染物。该系统配置为以1 CFM的速度对空气进行采样，确保最佳的冲击速度和准确的数据收集。

结论

持续的微生物监测是保持洁净室环境无菌的一个基本方面。RAC系统具有先进的功能并符合国际标准，为持续的环境监测提供了有效的解决方案。实施ISO 14698和EN 17141中概述的强大CCS对于确保产品质量和患者安全至关重要